一、概述:
在细胞内蛋白质磷酸化是一种重要的翻译后修饰,由特定位点的蛋白质激酶催化把磷酸基团从一个化合物转移到另一个化合物上的过程。调控着细胞的基本进程,如细胞周期调控、细胞生长和分化等。质谱鉴定蛋白质的磷酸化位点是利用蛋白质经过胰蛋白酶消化后,纯化出磷酸化多肽,质谱鉴定出磷酸化位点。
二、技术优势:与传统的western鉴定磷酸化相比,通过质谱鉴定蛋白质的磷酸化位点可以定位到氨基酸。
三、技术服务流程:
1、质谱鉴定(蛋白鉴定)样品的制备:利用磷酸化抗体免疫共沉淀沉淀出磷酸化蛋白质、IMAC纯化磷酸化蛋白质、表达和纯化磷酸化蛋白质和放射性同位素标记磷酸化蛋白;
2、蛋白质的分离:纯化后的磷酸化蛋白质经过凝胶电泳分离后,割取磷酸化蛋白质条带用胰蛋白酶酶切;
3、质谱鉴定(蛋白鉴定)的鉴定:质谱鉴定磷酸化位点;
4、实验报告提交。
四、服务内容:
1、质谱鉴定(蛋白鉴定)的分离、纯化、割取和酶切;
2、质谱分析;数据库检索;
3、提交质谱鉴定(蛋白鉴定)实验报告。